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SuperCultureTM 小鼠淋巴细胞培养基

发布时间:2016年11月8日

 

                                              

                                                         

     

 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基(Serum-Free Medium for Lymphocyte)适用于小鼠淋巴细胞、DC 细胞的体外培养。本产品是一款化学成分限定的培养基,该培养基中的所有成分均使用细胞培养级别的原料生产,不含血清,有效避免血清质量变动及血清组分、外源成分对实验研究的影响,可实现小鼠淋巴细胞、DC 细胞等免疫细胞的体外培养。

使用方法:

1:小鼠T淋巴细胞培养

 

1、 培养器皿的预包被:取 5μg/ml 小鼠 CD3 单抗包被培养器皿,4℃过夜或 37℃孵 2 小时。使用前移除剩余包被液。

2、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基放置室温平衡。

3、 无菌分离小鼠外周血淋巴细胞或脾脏淋巴细胞(建议使用达优小鼠淋巴细胞分离

液:DKW33-R0100)。

4、 根据计数结果,用SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基将分离获得的淋巴细胞按2-2.5×106 /ml 的浓度接种于已包被小鼠 CD3 单抗的细胞培养器皿中,加入 5μg/ml 的小鼠 CD28 单抗、300U/ml 的 rmIL-2,刺激 T 淋巴细胞的生长和增殖,37℃,5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。

5、 观察细胞活化状态,每 2-3  天取样计数细胞浓度并根据计数结果补充新鲜

SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基(含 300U/ml 的 rmIL-2),调整细胞浓度为 1.5×106/ml。

6、 收获细胞供后续检测或实验使用。

 

2:小鼠骨髓DC细胞培养

1、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基放置室温平衡。

2、 无菌分离小鼠骨髓单核细胞。根据计数结果,用 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞

培养基将分离获得的单核细胞按 1-5×106 /ml 的浓度接种于 6 孔板或 12 孔板中,每孔加入终浓度 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4,37℃,5% CO2、饱和湿度的培养箱培养。

3、 48 小时后,轻轻晃动培养板,吸弃全部培养基及悬浮细胞,加含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4 的新鲜培养基继续培养。

4、 隔日半量换液,即收集旧培养液,离心后用含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4

的新鲜培养基重悬细胞沉淀,然后再将细胞悬液放回原皿。

5、 第 6 天半量换液后加细胞因子 TNF-α 1000U/ml 或其他促成熟的细胞因子,继

续培养两天,以促进树突状细胞成熟(可在 TNF-α 加入前 1 天加入抗原,以获得抗原负载的 DC)。

6、 收集悬浮和轻微贴壁的细胞,即为成熟的 DC。

保存方法:

2~8℃,避光保存,保持无菌,保质期 12 个月。

注意:

 

本品避免反复冻融,使用时注意无菌操作。

本品培养T淋巴细胞时,加入2-5%的细胞培养添加物可增强细胞扩增效率。

 

货号

       名称

规格

 

 

 

 

 

 

SuperCultureTM 小鼠淋巴细胞培养基

 

 

DKW34-MCL1

 

250ml

 

 

Serum-Free Medium for Mouse Lymphocyte

 

 

 

 

 

 

 

 

本品仅供研究使用。

地址:深圳市南山区蛇口沿山路43号 创业壹号大楼 A栋 203室 免费热线(Free Hotline):400 630 4366 电话(Tel):+86-755-26405921 传真(Fax):+86-755-26401908